特定の波長における吸光度の理解：分光光度法における手頃な価格の精度

メチレンブルーは、診療現場では医薬品として、また血液学、免疫血液学、臨床微生物学の研究室では、細胞や遺伝物質を染色するための染料として使用される塩である。その吸収ピークは668 nmおよび609 nmにある（『メルク・インデックス』）。 脱イオン水に溶解した異なる濃度のメチレンブルーについて、1 mLの透明ガラスバイアルおよびEmitt.405、Emitt.520、Emitt.635、Emitt.850カートリッジを用いて、ABSOR.B™で測定を行った。

図2は、平均値±標準偏差を示している（各濃度について3つの異なる試料を測定、n=3）。スペクトル（図1の矢印）から予想された通り、赤色光（635 nm）は強く吸収され、続いて緑色光（520 nm）がわずかに吸収された。 紫青色（405 nm）および赤外線（850 nm）の光については、調査対象の濃度範囲において吸収はほぼゼロであった。

溶液の濃度がそれほど高くないこと、および入射光が単色光であることを前提とすれば、吸光度と濃度の関係はビール・ランベルトの法則に従って直線的である。赤色光を用いて得られたこの直線関係を利用することで、未知溶液中のメチレンブルーの濃度を測定することができる。

吸光度の結果と一致して、溶液中のメチレンブルーの濃度が高くなるにつれて、赤色光（635 nm）の透過率は低下した。 10 mg/Lでは、透過した光は10%未満であった。緑色光（520 nm）、紫青色光（405 nm）、および赤外光（850 nm）については、透過率がわずかに低下したが（いずれも85%以上を維持していた）。