什么是吸光度？探讨其在分光光度法中的作用
吸光度是分光光度法领域中的一个关键概念，该技术用于测量物质在宽波长范围内吸收的光量。它是从入射光与穿过样品的透射光之比的对数推导出的无量纲量。 吸光度光谱通常以图表形式呈现，揭示了物质吸收光线最强的波长（图1）。这一信息在生物学、化学、生物化学、分子生物学等众多科学领域中，对于鉴定和定量样品中的特定化合物或分子具有重要作用。
图1： 亚甲蓝溶液的吸光度 光谱。
使用 ABSOR.B™ 测量特定波长的吸光度：化学与生物化学分析中的精准度
使用 ABSOR.B™ 测定亚甲蓝在特定波长下的吸光度和透光率
亚甲蓝是一种盐类，在临床上用作药物，在实验室中则作为血液学、免疫血液学和临床微生物学领域的染色剂，用于对细胞和遗传物质进行染色。其吸收峰分别位于668 nm和609 nm（默克索引）。在ABSOR.B™系统中，使用1毫升透明玻璃小瓶以及Emitt.405、Emitt.520、Emitt.635、Emitt.850滤芯，对去离子水中不同浓度的亚甲蓝进行了测试。
图2显示了平均结果±标准差（每种测试浓度均取三个不同样本，n=3）。正如光谱所示（图1中的箭头所指），红光（635 nm）被强烈吸收，其次是绿光（520 nm）的轻微吸收。 在所研究的浓度范围内，紫蓝色光（405 nm）和红外光（850 nm）的吸收几乎为零。
根据比尔-朗伯定律，在溶液浓度不高且入射光为单色光的情况下，吸光度与浓度之间呈线性关系。利用红光测得的线性关系可用于测定未知溶液中亚甲蓝的浓度。
根据吸光度测定结果，随着溶液中亚甲蓝浓度的增加，红光（635 nm）的透光率逐渐降低。 当浓度为10 mg/L时，透光率低于10%。绿色光（520 nm）、紫蓝色光（405 nm）和红外光（850 nm）的透光率略有下降（但始终高于85%）。
图2：使用Emitt.405、Emitt.520、 Emitt.635 及 Emitt.850 光学滤光片时，甲基蓝的吸光度和透光率随浓度（单位：mg/L）的变化（n=3，包含误差条但图中不可见）。
这些结果还表明，测量具有很高的重复性（包含误差条，但图中未显示），其标准偏差始终低于5%。总体而言，ABSOR.B™是一款现代化且价格实惠的仪器，可通过选择合适的波长精确测定不同溶质的浓度。
关键要点
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